單克隆抗體/多克隆抗體定制
抗體(Antibody)是機(jī)體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護(hù)作用的免疫球蛋白質(zhì),其結(jié)構(gòu)呈Y型。它由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,能夠特異性地識別并結(jié)合外來物質(zhì)(如細(xì)菌、病毒或毒素),幫助身體清除這些有害物質(zhì)。
1 單克隆抗體
單克隆抗體(Monoclonal Antibody, mAb)是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。與多克隆抗體相比,單抗具有更好高的親和力和特異性,在生物醫(yī)學(xué)研究、疾病診斷和某些疾病治療(如傳染病和癌癥)中起到重要作用。
單克隆抗體制備技術(shù)有有三種,分別為雜交瘤技術(shù)(Hybridoma Technology)、噬菌體展示技術(shù)(Phage Display Technology)和單B細(xì)胞技術(shù)(Single B Cell Technology)。目前本平臺單克隆抗體制備技術(shù)主要為雜交瘤技術(shù)。
雜交瘤技術(shù)是將抗原免疫小鼠的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合形成雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)選擇性培養(yǎng)和克隆化篩選,獲得能夠穩(wěn)定分泌單一特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞株,最終通過規(guī)?;囵B(yǎng)和純化制備目標(biāo)單克隆抗體。適用于常規(guī)單克隆抗體制備(如科研試劑、診斷抗體)和需保留天然抗體結(jié)構(gòu)的應(yīng)用(如功能性研究)。
其優(yōu)點(diǎn)是:
(1)穩(wěn)定性高,雜交瘤細(xì)胞可長期傳代,實(shí)現(xiàn)抗體持續(xù)生產(chǎn);
(2)技術(shù)成熟,已廣泛應(yīng)用于科研,診斷以及抗體藥物發(fā)現(xiàn);
(3)多功能性,可工程化改造,優(yōu)化抗體性能或賦能新功能。
噬菌體展示技術(shù)是將抗體可變區(qū)基因片段插入噬菌體基因組,使其以scFv(單鏈抗體)或Fab片段的形式展示在噬菌體表面。通過固相化抗原進(jìn)行多輪“吸附-洗脫-擴(kuò)增”淘選過程,富集高親和力特異性抗體,最終獲得目標(biāo)單克隆抗體。適用于生物制藥(如疫苗設(shè)計、藥物開發(fā))和高親和力抗體篩選。
其優(yōu)點(diǎn)是:
(1)多樣性,天然噬菌體庫容量可達(dá)1011,覆蓋更廣的抗原表位;
(2)周期短,無免疫和細(xì)胞融合等步驟,實(shí)驗(yàn)周期縮短。
單B細(xì)胞抗體技術(shù)利用單個B細(xì)胞僅表達(dá)單一功能性重鏈和輕鏈基因的特性,通過流式分選或微流控技術(shù)分離抗原特異性B細(xì)胞,并采用單細(xì)胞PCR擴(kuò)增其抗體可變區(qū)基因,經(jīng)重組表達(dá)后獲得具有天然配對結(jié)構(gòu)的單克隆抗體。適用于疾病中和抗體開發(fā)。
其優(yōu)點(diǎn)是:
(1)天然配對,保留原始輕重鏈組合,抗體親和力與特異性更優(yōu);
(2)高通量,結(jié)合流式篩選技術(shù),能夠快速,準(zhǔn)確獲得大量陽性B細(xì)胞;
平臺提供的產(chǎn)品由具有15年抗體開發(fā)經(jīng)驗(yàn)的工匠完成,技術(shù)路線成熟,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠、靈敏度極高,產(chǎn)品深受下游客戶好評。
服務(wù)優(yōu)勢:
(1)準(zhǔn)——基于抗原分析系統(tǒng)與蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測技術(shù),精準(zhǔn)設(shè)計最佳抗原方案,確保特異性;
(2)快——自主研發(fā)創(chuàng)新試劑(如快速佐劑、專用培養(yǎng)基)將開發(fā)周期從6個月縮短至3個月,且提升雜交瘤細(xì)胞穩(wěn)定性;
(3)穩(wěn)——實(shí)現(xiàn)抗原平臺與抗體驗(yàn)證平臺無縫銜接,提高項(xiàng)目成功率并加速交付;
(4)省心——推出“零預(yù)付,包成功”合作模式,承諾100%項(xiàng)目成功率,最大程度降低客戶風(fēng)險。
服務(wù)流程:
方案溝通-合同簽訂-免疫原制備-動物免疫-細(xì)胞融合--細(xì)胞篩選-亞克隆篩選--抗體純化-抗體驗(yàn)證-成果交付。
2 多克隆抗體
多克隆抗體(Polyclonal Antibodies, pAbs)是由多個B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的抗體混合物,能夠識別同一抗原的多個不同表位(抗原上的不同區(qū)域)。這類抗體的核心優(yōu)勢在于能夠同時識別抗原的多個表位,在免疫檢測中表現(xiàn)出優(yōu)異的性能,比如凝集反應(yīng)和免疫沉淀反應(yīng)。
多克隆抗體是由免疫動物血清中提取的抗體混合物,其制備方法是通過抗原免疫實(shí)驗(yàn)動物后直接分離純化血清獲得。
服務(wù)優(yōu)勢:
(1)可靠——工匠具有15年抗體開發(fā)經(jīng)驗(yàn),技術(shù)積累深厚,抗體研發(fā)成功率高;
(2)靈活——支持多物種(小鼠、兔、大鼠等)協(xié)同免疫,適配多色染色等復(fù)雜場景;
(3)快速——全技術(shù)閉環(huán)平臺,極大的縮短了項(xiàng)目周期,最快30天可獲得高效價抗體。
服務(wù)流程:
方案溝通-合同簽訂-免疫原制備-動物免疫-效價檢測--抗體純化-抗體驗(yàn)證-成果交付。
案例展示
七次跨膜的線粒體內(nèi)膜蛋白單克隆抗體定制
ND4 2D9大鼠腸組織200倍
ND4 2D9小鼠腸組織200倍
Western blot結(jié)果
單克隆抗體定制
1. 服務(wù)項(xiàng)目
服務(wù)名稱 | 服務(wù)內(nèi)容 | 抗原來源 | 服務(wù)周期 |
普通單克隆抗體制備 | 小鼠單克隆抗體制備 | 客戶/工匠提供 | 4-6月 |
大鼠單克隆抗體制備 | 5-6月 | ||
快速單克隆抗制備 | 小鼠快速單克隆抗體制備 | 客戶/工匠提供 | 1.5-2月 |
大鼠快速單克隆抗體制備 | 2-3月 | ||
保證型單克隆抗體制備 | 免疫沉淀(IP)保證型單克隆抗體制備 | 咨詢 | 5-6月 |
免疫印記(WB)保證型單克隆抗體制備 | |||
免疫熒光(IF)保證型單克隆抗體制備 |
2. 交付內(nèi)容
1. 3-5株雜交瘤細(xì)胞
2. >5mg純化抗體
3. 100μL 腹水原液
4. 100μL免疫陽性血清
5. 項(xiàng)目報告,包括抗原生產(chǎn)、雜交瘤構(gòu)建、篩選、克隆化及其相關(guān)檢測的整套數(shù)據(jù)。
6. 保證型單克隆抗體定制服務(wù)提供相應(yīng)的內(nèi)源性檢測數(shù)據(jù)。(不成功不收費(fèi))
多克隆抗體定制
1. 服務(wù)項(xiàng)目
物種 | 服務(wù)類型 | 抗原來源 | 周期 |
兔 | 多克隆抗血清制備 | 客戶/工匠提供 | 13-16周 |
Protein A 純化多克隆抗體制備 | 14-17周 | ||
抗原親和純化多克隆抗體制備 | |||
小鼠 | 多克隆抗血清制備 | 客戶/工匠提供 | 13-16周 |
Protein A 純化多克隆抗體制備 | 14-17周 | ||
大鼠 | 多克隆抗血清制備 | 客戶/工匠提供 | 13-16周 |
Protein G純化多克隆抗體制備 | 14-17周 | ||
豚鼠 | 多克隆抗血清制備 | 客戶/工匠提供 | 13-16周 |
Protein A純化多克隆抗體制備 | 14-17周 | ||
山羊 | 多克隆抗血清制備 | 客戶/工匠提供 | 咨詢 |
Protein G純化多克隆抗體制備 | |||
雞 | 抗原親和純化多克隆抗體制備 | 客戶/工匠提供 | 咨詢 |
抗IgY純化抗體多克隆抗體制備 | |||
保證型抗體制備 | 可提供多物種,不同應(yīng)用的保證型多克隆抗體定制 | 客戶/工匠提供 | 咨詢 |
2. 交付內(nèi)容
1、 200 μL免疫前陰性血清(小鼠提供50μL)。
2、1 mg以上制備的重組蛋白或多肽抗原。
3、3-20 mg抗原親和純化多克隆抗體(濃度>1 mg/mL)。
4、保證型多克隆抗體定制服務(wù)提供相應(yīng)的內(nèi)源性檢測數(shù)據(jù)(不成功不收費(fèi))。